بیان آنتی بادی زنجیره سنگین شتری (نانوبادی) علیه زیرواحد urec آنزیم اوره آز هلیکوباکترپیلوری در پیکیاپاستوریس

thesis
abstract

در طول دو دهه گذشته مخمرمتیلوتروفیک پیکیا پاستوریس به عنوان یکی از موفق ترین سیستم های بیانی جهت تولید انواعی از پروتئینهای نوترکیب مورد استفاده قرار گرفته است. این مخمر قابلیت انجام بسیاری از تغییرات پس از ترجمه ای یوکاریوتی مانند گلیکوزیلاسیون، تشکیل پیوندهای دی سولفیدی و در نتیجه فولدینگ صحیح پروتئین دارد. با وجود این مزایا، پیکیا پاستوریس می تواند یک جایگزین عالی برای سیستم بیانی اشرشیا کلی باشد. در این پژوهش، آنتی بادی زنجیره سنگین شتری علیه زیر واحد urec آنزیم اوره آز هلیکوباکترپیلوری در پیکیا پاستوریس بیان و سپس تخلیص گردید. ژن vhh دروکتور ppink-hc کلون و در ابتدا به باکتری اشرشیا کلی، سویه top10 منتقل شد. سپس وکتور حاوی ژن vhh به منظور ورود به ژنوم مخمرخطی شد و به سلول های مستعد مخمری منتقل گردید. تعدادی از کلونی های ترانسفورم شده انتخاب و در محیط کشت بیانی مخمر (bmgy,bmmy) کشت داده شد وvhh نوترکیب درپیکیا پاستوریس بیان شد. بیان پروتئین به وسیله sds-page آنالیز گردید و مشاهده شد که میزان بیان پروتئین در مخمر پیکیا پاستوریس نسبت به باکتری اشرشیا کلی بالاتر است. در نهایت کارایی نانوبادی بیان شده در شرایط invitro مورد ارزیابی قرار گرفت. همچنین مقایسه ای بین کارایی نانوبادی بیان شده در باکتری و مخمر صورت گرفت و مشخص شد که نانوبادی بیان شده در مخمر در جهت مهار آنزیم اوره آز کارایی بهتری دارد.

First 15 pages

Signup for downloading 15 first pages

Already have an account?login

similar resources

تولید آنتی بادی زنجیره سنگین شتری علیه آنزیم اوره آز هلیکوباکترپیلوری

شترسانان در سرمشان نوع خاصی از ایزوتیپ igg را دارا می باشند که به علت نداشتن زنجیره سبک، آنتی بادی زنجیره سنگین hcab نام گذاری شده اند. بخش متغیر این نوع آنتی بادی(vhh)، دارای ویژگی های منحصر به فردی است که منجر به کاربرد وسیع آن در بیوتکنولوژی شده است. در این مطالعه هدف انتخاب vhh با اختصاصیت بسیار بالا علیه زیرواحد urec آنزیم اوره آز هلیکوباکترپیلوری می باشد. هلیکو باکتر پیلوری یک باکتری گرم ...

15 صفحه اول

تهیه دیابادی از نانوبادی های مشتق شده از زنجیره سنگین شتری علیه زیرواحد urec آنزیم اوره آز هلیکوباکتر پیلوری

عفونت با هلیکوباکتر پیلوری، عامل اصلی ایجاد سه بیماری مهم دستگاه گوارش فوقانی می باشد اوره آز مهمترین عامل بیماری زایی هلیکوباکتر پیلوری است. مشکلات ناشی از استفاده آنتی بیوتیک ها و واکسن ها جهت درمان هلیکوباکترپیلوری، مطالعات را به سمت استفاده از آنتی بادی سوق داده است. نانوبادی ها به دلیل اندازه کوچک شان، برای ساخت ملکول های بزرگ تر مانند دیابادی ها بسیار مناسب هستند. بنابراین ازطریق اتصال دو...

بیان آنتی بادی زنجیره سنگین شتری(نانوبادی)علیه نوروتوکسین بوتولینوم تیپ e در pichia pastoris

چکیده مخمر پیکیا پاستوریس یک میزبان برجسته برای تولید پروتئین های نوترکیب است و در مقایسه با دیگر سیستم های بیانی مزایای فراوانی دارد. از جمله اینکه این سیستم به عنوان یک یوکاریوت، قادر است تعداد زیادی از تغییرات پس از ترجمه همچون پردازش پروتئولتیک، فولدینگ صحیح، تشکیل پیوند های دی سولفیدی و گلیکوزیلاسیون پروتئین ها را انجام دهد. همچنین قادر به استفاده از متانول به عنوان تنها منبع کربن در غیاب...

15 صفحه اول

تهیه نانوبادی نوترکیب مشتق شده از آنتی بادی های زنجیره سنگین شتری بر علیه آنتی ژن agsk1 سرطان روده بزرگ

سرطان روده بزرگ یکی از علل اصلی مرگ و میر ناشی از سرطان در جهان است .درمان اصلی رایج در حال حاضر شیمی سرطان روده بزرگ یکی از علل اصلی مرگ و میر ناشی از سرطان در جهان است .درمان اصلی رایج در حال حاضر شیمی درمانی و جراحی است. با توجه به عوارض جانبی و کم اثر بودن روشهای درمانی موجود، شانس زنده ماندن بیماران کمتر از 5 سال می باشد. درمان موثر به تشخیص زود هنگام و ارسال مناسب داروها به سلول های سرطان...

تهیه نانوبادی های مشتق شده از آنتی بادی های زنجیره سنگین شتری علیه آنتی ژن ca ix سلولهای سرطانی

ca ix (کربونیک انهیدراز9) عضوی از خانواده کربونیک انهیدرازهاست که به عنوان مارکر تشخیصی در تومورهای هیپوکسیک شناخته شده است. این آنزیم علاوه بر تنظیم ph –که مشخصه اصلی تمام کربونیک انهیدرازها می باشد- و شرکت در فرآیندهای تومورزایی، در چسبندگی سلول نیز نقش بازی می کند. تاکنون تلاش های زیادی در جهت تشخیص و/یا درمان بر اساس شناسایی و/یا ممانعت از عمل این آنزیم انجام گرفته است. در این پژوهش با استف...

15 صفحه اول

تهیه نانوبادی های نوترکیب مشتق شده از آنتی بادی های زنجیره سنگین شتری بر علیه لیپوپلی ساکارید باکتری ویبریو کلرا

شتر ها قادر به تولید آنتی بادی هایی فاقد زنجیره سبک می باشند و قطعات حاصل از انتهای آمین این آنتی بادی ها vhh یا نانوبادی نام داشته و دارای توانایی کامل اتصال به آنتی ژن می باشند. برخی از مزایای نانوبادی ها قابلیت تولید آسان و انبوه آن ها در میکروارگانیسم ها و توانایی استفاده از آن ها در سیستم هایی از قبیل نمایش فاژی، مخمری یا ریبوزومی می باشد. هدف این پژوهش تهیه نانوبادی هایی با قابلیت اتصال ب...

15 صفحه اول

My Resources

Save resource for easier access later

Save to my library Already added to my library

{@ msg_add @}


document type: thesis

وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه شاهد - دانشکده علوم پایه

Keywords

Hosted on Doprax cloud platform doprax.com

copyright © 2015-2023